ეთერზეთების ნაყარი ქარხანა | ჩინეთის ეთერზეთების ნაყარი მწარმოებლები და მომწოდებლები

არომათერაპიის სუფთა ნატურალური ევკალიპტის ფოთლის ეთერზეთი კანისა და სხეულის მოვლისთვის

ექსტრაქციის ან დამუშავების მეთოდი: ორთქლით გამოხდილი

დისტილაციის ექსტრაქციის ნაწილი: ფოთოლი

წარმოშობის ქვეყანა: ჩინეთი

გამოყენება: დიფუზური/არომათერაპია/მასაჟი

შენახვის ვადა: 3 წელი

პერსონალიზებული მომსახურება: ინდივიდუალური ეტიკეტი და ყუთი ან თქვენი მოთხოვნის შესაბამისად

სერტიფიცირება: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

ევკალიპტის ზეთი რეაგირებს ლორწოსთან და აადვილებს მის ფხვიერებას, რაც მყისიერად შვებას უზრუნველყოფს სუნთქვის უკმარისობისა და სხვა სასუნთქი გზების პრობლემებისგან. ის საკმარისად ძლიერია მწერების საწინააღმდეგო საშუალებად მუშაობისთვის. არომათერაპიაში გამოყენებისას ის აზროვნების სიცხადეს უზრუნველყოფს. მისი თერაპიული სარგებელი განპირობებულია მისი ანტიმიკრობული, ანტიბაქტერიული, ანტისეპტიკური, სპაზმოლიზური და ანტივირუსული თვისებებით. გამოიყენეთ ევკალიპტის ზეთი კანისა და ჯანმრთელობის სხვადასხვა პრობლემის სამკურნალოდ. ის შეიცავს ევკალიპტოლს, რომელიც ასევე ცნობილია როგორც ცინეოლი. ეს ნაერთი ხელს შეუწყობს თქვენს ზოგად ჯანმრთელობას და კეთილდღეობას.

დეტალი
ნატურალური, სუფთა ორგანული ლავანდის ეთერზეთი არომათერაპიის კანის მოვლისთვის

ექსტრაქციის ან დამუშავების მეთოდი: ორთქლით გამოხდა

დისტილაციის ექსტრაქციის ნაწილი: ყვავილი

წარმოშობის ქვეყანა: ჩინეთი

გამოყენება: დიფუზური/არომათერაპია/მასაჟი

შენახვის ვადა: 3 წელი

პერსონალიზებული მომსახურება: ინდივიდუალური ეტიკეტი და ყუთი ან თქვენი მოთხოვნის შესაბამისად

სერტიფიცირება: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

დეტალი
100% სუფთა ნატურალური ორგანული მაგნოლიის ქერქის ზეთის ეთერზეთი კანის მოვლისთვის

ჰოუ პოს სურნელი მაშინვე მწარე და მკვეთრად მძაფრია, შემდეგ კი თანდათან იხსნება ღრმა, სიროფისებრი სიტკბოთი და სითბოთი.

ჰოუ პოს კავშირი აქვს დედამიწისა და ლითონის ელემენტებთან, სადაც მისი მწარე სითბო ძლიერად მოქმედებს ცისა და მშრალი ტენიანობის დაცემაზე. ამ თვისებების გამო, იგი გამოიყენება ჩინურ მედიცინაში საჭმლის მომნელებელ ტრაქტში სტაგნაციისა და დაგროვების, ასევე ხველისა და ხიხინის შესამსუბუქებლად, რომელიც გამოწვეულია ნახველით, რაც ფილტვებს ახშობს.

მაგნოლია ოფიცინიალი ფოთოლმცვივანი ხეა, რომელიც სიჩუანის, ჰუბეის და ჩინეთის სხვა პროვინციების მთებსა და ხეობებში იზრდება. ტრადიციულ ჩინურ მედიცინაში გამოყენებული მაღალარომატული ქერქი ღეროებს, ტოტებსა და ფესვებს აცლიან და აპრილიდან ივნისამდე აგროვებენ. სქელი, გლუვი ქერქი, რომელიც ზეთითაა გაჯერებული, შიდა მხრიდან მეწამული ფერისაა და ბროლის მსგავსი ბზინვარებით გამოირჩევა.

პრაქტიკოსებმა შეიძლება განიხილონ ჰოუ პოს ცინ პის ეთერზეთთან შერწყმა, როგორც მთავარი დამატება ნარევებში, რომლებიც მიზნად ისახავს დაგროვებების დაშლას.

დეტალი
OEM-ის ინდივიდუალური შეფუთვის მქონე ნატურალური მაკროცეფალო რიზომის ზეთი

როგორც ეფექტური ქიმიოთერაპიული საშუალება, 5-ფტორურაცილი (5-FU) ფართოდ გამოიყენება კუჭ-ნაწლავის ტრაქტის, თავის, კისრის, გულმკერდის და საკვერცხეების ავთვისებიანი სიმსივნეების სამკურნალოდ. 5-FU კლინიკაში კოლორექტალური კიბოს სამკურნალოდ პირველი რიგის პრეპარატია. 5-FU-ს მოქმედების მექანიზმია სიმსივნურ უჯრედებში ურაცილის ნუკლეინის მჟავას თიმინის ნუკლეინის მჟავად გარდაქმნის დაბლოკვა, შემდეგ კი დნმ-ის და რნმ-ის სინთეზსა და აღდგენაზე ზემოქმედება მისი ციტოტოქსიური ეფექტის მისაღწევად (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). თუმცა, 5-FU ასევე იწვევს ქიმიოთერაპიით გამოწვეულ დიარეას (CID), ერთ-ერთ ყველაზე გავრცელებულ გვერდით რეაქციას, რომელიც ბევრ პაციენტს აწუხებს (Filho et al., 2016). 5-FU-თი ნამკურნალებ პაციენტებში დიარეის შემთხვევები 50%-80%-მდე იყო, რამაც სერიოზულად იმოქმედა ქიმიოთერაპიის მიმდინარეობასა და ეფექტურობაზე (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). შესაბამისად, 5-FU-თი გამოწვეული ცისტური იშემიის ეფექტური თერაპიის პოვნა უმნიშვნელოვანესია.

ამჟამად, ქრონიკული ჩირქოვანი დაავადების კლინიკურ მკურნალობაში დანერგილია არაწამლისმიერი და მედიკამენტური ჩარევები. არაწამლისმიერი ჩარევები მოიცავს გონივრულ დიეტას და დანამატებს მარილით, შაქრით და სხვა საკვები ნივთიერებებით. ქრონიკული ჩირქოვანი დაავადების დიარეის საწინააღმდეგო თერაპიაში ფართოდ გამოიყენება ისეთი პრეპარატები, როგორიცაა ლოპერამიდი და ოქტრეოტიდი (Benson et al., 2004). გარდა ამისა, სხვადასხვა ქვეყანაში ქრონიკული ჩირქოვანი დაავადების სამკურნალოდ გამოიყენება ეთნომედიცინები, რომლებიც საკუთარი უნიკალური თერაპიით გამოიყენება. ტრადიციული ჩინური მედიცინა (TCM) ერთ-ერთი ტიპიური ეთნომედიცინაა, რომელიც 2000 წელზე მეტია გამოიყენება აღმოსავლეთ აზიის ქვეყნებში, მათ შორის ჩინეთში, იაპონიასა და კორეაში (Qi et al., 2010). ტრადიციული ჩინური მედიცინა მიიჩნევს, რომ ქიმიოთერაპიული პრეპარატები იწვევს ცის მოხმარებას, ელენთის დეფიციტს, კუჭის დისჰარმონიას და ენდოფიტურ ტენიანობას, რაც იწვევს ნაწლავების გამტარ დისფუნქციას. ტრადიციული ჩინური მედიცინის თეორიაში, ქრონიკული ჩირქოვანი დაავადების მკურნალობის სტრატეგია ძირითადად უნდა იყოს დამოკიდებული ცის დამატებაზე და ელენთის გაძლიერებაზე (Wang et al., 1994).

გამხმარი ფესვები;ატრაქტილოდები მაკროცეფალაკოიძ. (AM) დაპანაქს ჟენშენიCA Mey. (PG) ტრადიციული ჩინური მედიცინის ტიპური მცენარეული მედიკამენტებია, რომლებსაც იგივე ეფექტი აქვთ - ცის დამატება და ელენთის გაძლიერება (Li et al., 2014). AM და PG ჩვეულებრივ გამოიყენება როგორც მცენარეული წყვილი (ჩინური მცენარეული თავსებადობის უმარტივესი ფორმა), რომელთა ეფექტიც დიარეის სამკურნალოდ ცის დამატებას და ელენთის გაძლიერებას წარმოადგენს. მაგალითად, AM და PG დოკუმენტირებულია კლასიკურ ანტიდიარეულ ფორმულებში, როგორიცაა Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang-დან.Taiping Huimin Heji Ju Fang(სონგის დინასტია, ჩინეთი) და ბუ ჩონგ ი ცი ტანგიპი ვეი ლუნ(იუანის დინასტია, ჩინეთი) (სურ. 1). რამდენიმე წინა კვლევაში აღნიშნული იყო, რომ სამივე ფორმულას აქვს CID-ის შემსუბუქების უნარი (ბაი და სხვ., 2017; ჩენ და სხვ., 2019; გოუ და სხვ., 2016). გარდა ამისა, ჩვენმა წინა კვლევამ აჩვენა, რომ შენჟუს კაფსულას, რომელიც შეიცავს მხოლოდ AM-ს და PG-ს, აქვს პოტენციური გავლენა დიარეის, კოლიტის (სიექსის სინდრომი) და სხვა კუჭ-ნაწლავის დაავადებების მკურნალობაზე (ფენგი და სხვ., 2018). თუმცა, არცერთ კვლევაში არ განხილულა AM-ს და PG-ს ეფექტი და მექანიზმი CID-ის მკურნალობაში, იქნება ეს კომბინაციაში თუ ცალ-ცალკე.

ამჟამად, ნაწლავის მიკრობიოტა განიხილება, როგორც პოტენციური ფაქტორი ტრადიციული ჩინური მედიცინის თერაპიული მექანიზმის გასაგებად (Feng et al., 2019). თანამედროვე კვლევები მიუთითებს, რომ ნაწლავის მიკრობიოტა გადამწყვეტ როლს ასრულებს ნაწლავის ჰომეოსტაზის შენარჩუნებაში. ჯანსაღი ნაწლავის მიკრობიოტა ხელს უწყობს ნაწლავის ლორწოვანი გარსის დაცვას, მეტაბოლიზმს, იმუნურ ჰომეოსტაზსა და რეაქციას, ასევე პათოგენების დათრგუნვას (Thursby and Juge, 2017; Pickard et al., 2017). ნაწლავის მიკრობიოტას დარღვევა პირდაპირ ან ირიბად არღვევს ადამიანის ორგანიზმის ფიზიოლოგიურ და იმუნურ ფუნქციებს, რაც იწვევს გვერდით რეაქციებს, როგორიცაა დიარეა (Patel et al., 2016; Zhao and Shen, 2010). კვლევებმა აჩვენა, რომ 5-FU-მ შესამჩნევად შეცვალა ნაწლავის მიკრობიოტას სტრუქტურა დიარეით დაავადებულ თაგვებში (Li et al., 2017). ამრიგად, დილის და საღამოს კვების გავლენა 5-FU-თი გამოწვეულ დიარეაზე შეიძლება განპირობებული იყოს ნაწლავის მიკრობიოტით. თუმცა, ჯერჯერობით უცნობია, შეუძლია თუ არა AM-ს და PG-ს ცალ-ცალკე ან კომბინაციაში 5-FU-თი გამოწვეული დიარეის პრევენცია ნაწლავის მიკრობიოტის მოდულირებით.

AM-სა და PG-ს დიარეის საწინააღმდეგო ეფექტებისა და ძირითადი მექანიზმის შესასწავლად, თაგვებში დიარეის მოდელის სიმულირებისთვის გამოვიყენეთ 5-FU. აქ ჩვენ ყურადღება გავამახვილეთ ერთჯერადი და კომბინირებული მიღების (AP) პოტენციურ ეფექტებზე.ატრაქტილოდები მაკროცეფალაეთერზეთი (AMO) დაპანაქს ჟენშენი5-FU ქიმიოთერაპიის შემდეგ დიარეაზე, ნაწლავურ პათოლოგიასა და მიკრობულ სტრუქტურაზე, საერთო საპონინებზე (PGS), შესაბამისად, AM-დან და PG-დან ამოღებულ აქტიურ კომპონენტებზე.

დეტალი
100% სუფთა ნატურალური Eucommiae Foliuml Oil ეთერზეთი კანის მოვლისთვის

ევკომია ულმოიდები(EU) (ჩინურად ხშირად „დუ ჟონგს“ უწოდებენ) მიეკუთვნება Eucommiaceae-ს ოჯახს, პატარა ხის გვარს, რომელიც ცენტრალური ჩინეთის მშობლიურია [1] ეს მცენარე ფართოდ არის მოყვანილი ჩინეთში მისი სამკურნალო მნიშვნელობის გამო. EU-დან იზოლირებულია დაახლოებით 112 ნაერთი, მათ შორის ლიგნანები, ირიდოიდები, ფენოლები, სტეროიდები და სხვა ნაერთები. ამ მცენარის დამატებითმა მცენარეულმა ფორმულამ (მაგალითად, გემრიელი ჩაი) გამოავლინა გარკვეული სამკურნალო თვისებები. EU-ს ფოთოლს აქვს უფრო მაღალი აქტივობა, რომელიც დაკავშირებულია ქერქთან, ყვავილთან და ნაყოფთან [2,3]. ცნობილია, რომ ევროკავშირის ფოთლები აძლიერებს ძვლებისა და სხეულის კუნთების სიმტკიცეს [4], რაც იწვევს ადამიანებში სიცოცხლის ხანგრძლივობას და ნაყოფიერების ხელშეწყობას [5]. ცნობილია, რომ ევროკავშირის ფოთლისგან დამზადებული გემრიელი ჩაის ფორმულა ამცირებს ცხიმიანობას და აძლიერებს ენერგიის მეტაბოლიზმს. ფლავონოიდული ნაერთები (როგორიცაა რუტინი, ქლოროგენის მჟავა, ფერულის მჟავა და კოფეინის მჟავა) ევროკავშირის ფოთლებში ანტიოქსიდანტურ აქტივობას ავლენენ [6].

მიუხედავად იმისა, რომ ევროკავშირის ფიტოქიმიური თვისებების შესახებ საკმარისი ლიტერატურა არსებობს, არსებობს მცირე რაოდენობით კვლევა ევროკავშირის ქერქიდან, თესლიდან, ღეროებიდან და ფოთლებიდან მოპოვებული სხვადასხვა ნაერთების ფარმაკოლოგიურ თვისებებზე. ეს მიმოხილვითი ნაშრომი განმარტავს დეტალურ ინფორმაციას ევროკავშირის სხვადასხვა ნაწილიდან (ქერქი, თესლი, ღერო და ფოთოლი) მოპოვებული სხვადასხვა ნაერთების და ამ ნაერთების ჯანმრთელობის ხელშემწყობი თვისებებისთვის პერსპექტიული გამოყენების შესახებ სამეცნიერო მტკიცებულებების გამოყენებით და ამით უზრუნველყოფს ევროკავშირის გამოყენების საცნობარო მასალას.

დეტალი
სუფთა ნატურალური ჰუტუინია კორდატას ზეთი ჰუტუინია კორდატას ზეთი ლიხთამოლუმის ზეთი

განვითარებადი ქვეყნების უმეტესობაში მოსახლეობის 70-95% პირველადი ჯანდაცვისთვის ტრადიციულ მედიკამენტებს იყენებს და აქედან 85% აქტიურ ნივთიერებად მცენარეებს ან მათ ექსტრაქტებს იყენებს.1] მცენარეებიდან ახალი ბიოლოგიურად აქტიური ნაერთების ძიება, როგორც წესი, დამოკიდებულია ადგილობრივი პრაქტიკოსებისგან მიღებულ კონკრეტულ ეთნიკურ და ხალხურ ინფორმაციაზე და დღემდე ითვლება წამლების აღმოჩენის მნიშვნელოვან წყაროდ. ინდოეთში დაახლოებით 2000 პრეპარატი მცენარეული წარმოშობისაა.[2] სამკურნალო მცენარეების გამოყენებისადმი ფართოდ გავრცელებული ინტერესის გათვალისწინებით, ამჟამინდელი მიმოხილვაჰოუტუინია კორდატაThunb. გთავაზობთ განახლებულ ინფორმაციას ლიტერატურაში გამოქვეყნებული ბოტანიკური, კომერციული, ეთნოფარმაკოლოგიური, ფიტოქიმიური და ფარმაკოლოგიური კვლევების შესახებ.H. cordataThunb. ოჯახს ეკუთვნისზაურასებრნიდა ფართოდ არის ცნობილი, როგორც ჩინური ხვლიკის კუდი. ეს არის მრავალწლიანი ბალახოვანი მცენარე სტოლონიფერული რიზომით, რომელსაც ორი განსხვავებული ქიმიოტიპი აქვს.3,4] სახეობის ჩინური ქიმიოტიპი გვხვდება ველურ და ნახევრად ველურ პირობებში ინდოეთის ჩრდილო-აღმოსავლეთით აპრილიდან სექტემბრამდე.[5,6,7]H. cordataხელმისაწვდომია ინდოეთში, განსაკუთრებით ასამის ბრაჰმაპუტრას ხეობაში და ასამის სხვადასხვა ტომის მიერ გამოიყენება როგორც ბოსტნეულის სახით, ასევე ტრადიციულად სხვადასხვა სამკურნალო მიზნით.

დეტალი
100%-ით სუფთა Arctium lappa ზეთის მწარმოებელი - ნატურალური ლაიმის Arctium lappa ზეთი ხარისხის უზრუნველყოფის სერტიფიკატებით

ჯანმრთელობისთვის სასარგებლო თვისებები

ბურდოკის ფესვი ხშირად მიირთმევა, თუმცა მისი გამოშრობა და ჩაის დალევაც შეიძლება. ის კარგად მოქმედებს როგორც ინულინის წყარო,პრებიოტიკიბოჭკოვანი, რომელიც ხელს უწყობს საჭმლის მონელებას და აუმჯობესებს ნაწლავების ჯანმრთელობას. გარდა ამისა, ეს ფესვი შეიცავს ფლავონოიდებს (მცენარეული საკვები ნივთიერებები),ფიტოქიმიკატებიდა ანტიოქსიდანტები, რომლებიც ცნობილია ჯანმრთელობისთვის სასარგებლო თვისებებით.

გარდა ამისა, ბურდოკის ფესვს შეუძლია სხვა სარგებელიც მოგვცეს, როგორიცაა:

ქრონიკული ანთების შემცირება

ბურდოკის ფესვი შეიცავს უამრავ ანტიოქსიდანტს, როგორიცაა კვერცეტინი, ფენოლური მჟავები და ლუტეოლინი, რომლებიც ხელს უწყობენ თქვენი უჯრედების დაცვას.თავისუფალი რადიკალებიეს ანტიოქსიდანტები ხელს უწყობენ ანთების შემცირებას მთელ სხეულში.

ჯანმრთელობის რისკები

ოროვანდის ფესვი უსაფრთხოდ ითვლება ჩაის სახით ან მისართმევად. თუმცა, ეს მცენარე ძალიან ჰგავს ბელადონას ღამის ჩრდილის მცენარეებს, რომლებიც ტოქსიკურია. რეკომენდებულია ოროვანდის ფესვის შეძენა მხოლოდ სანდო გამყიდველებისგან და მისი დამოუკიდებლად შეგროვებისგან თავის შეკავება. გარდა ამისა, ბავშვებში ან ორსულ ქალებში მისი ზემოქმედების შესახებ მინიმალური ინფორმაცია არსებობს. ბავშვებთან ან ორსულობის შემთხვევაში ოროვანდის ფესვის გამოყენებამდე გაიარეთ კონსულტაცია ექიმთან.

აქ მოცემულია ჯანმრთელობისთვის შესაძლო რისკები, რომლებიც გასათვალისწინებელია ბურდოკის ფესვის გამოყენებისას:

გაზრდილი დეჰიდრატაცია

ოროვანდის ფესვი მოქმედებს როგორც ბუნებრივი შარდმდენი საშუალება, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს გაუწყლოება. თუ იღებთ შარდმდენ აბებს ან სხვა შარდმდენებს, არ უნდა მიიღოთ ოროვანდის ფესვი. თუ იღებთ ამ მედიკამენტებს, მნიშვნელოვანია იცოდეთ სხვა პრეპარატების, მწვანილებისა და ინგრედიენტების შესახებ, რომლებმაც შეიძლება გამოიწვიოს გაუწყლოება.

ალერგიული რეაქცია

თუ თქვენ გაქვთ მომატებული მგრძნობელობა ან ალერგიული რეაქციები გვირილების, ამბროზიის ან ქრიზანთემის მიმართ, თქვენ მომატებული რისკი გაქვთ, განვითარდეს ალერგიული რეაქცია ოროვანდის ფესვზე.

დეტალი
საბითუმო ფასი 100% სუფთა AsariRadix Et Rhizoma ზეთი რელაქს არომათერაპია Eucalyptus globulus

ცხოველებსა და ინ ვიტრო კვლევებში გამოკვლეულია საფროლისა და მისი კომპონენტების პოტენციური სოკოს საწინააღმდეგო, ანთების საწინააღმდეგო და გულ-სისხლძარღვთა ეფექტები. თუმცა, კლინიკური კვლევები არ ჩატარებულა და საფროლი არ ითვლება უსაფრთხოდ გამოსაყენებლად. საფროლი, საფროლის ფესვის ქერქისა და ზეთის მთავარი შემადგენელი ნაწილი, აკრძალულია აშშ-ს სურსათისა და წამლის ადმინისტრაციის (FDA) მიერ, მათ შორის არომატიზატორის ან სურნელის სახით გამოსაყენებლად და არ უნდა იქნას გამოყენებული როგორც შინაგანად, ასევე გარეგანად, რადგან ის პოტენციურად კანცეროგენულია. საფროლი გამოიყენება 3,4-მეთილენ-დიოქსიმეტამფეტამინის (MDMA) უკანონო წარმოებაში, რომელიც ასევე ცნობილია ქუჩის სახელწოდებით „ექსტაზი“ ან „მოლი“, ხოლო საფროლისა და საფროლის ზეთის გაყიდვას აკონტროლებს აშშ-ს ნარკოტიკებთან ბრძოლის ადმინისტრაცია.

დეტალი
საბითუმო ფასი 100% სუფთა Stellariae Radix-ის ეთერზეთი (ახალი) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus

ჩინური ფარმაკოპეა (2020 წლის გამოცემა) მოითხოვს, რომ YCH-ის მეთანოლის ექსტრაქტი არ უნდა იყოს 20.0%-ზე ნაკლები [2], ხარისხის შეფასების სხვა ინდიკატორების მითითების გარეშე. ამ კვლევის შედეგები აჩვენებს, რომ ველური და კულტივირებული ნიმუშების მეთანოლის ექსტრაქტების შემცველობა აკმაყოფილებდა ფარმაკოპეის სტანდარტს და მათ შორის მნიშვნელოვანი განსხვავება არ იყო. შესაბამისად, ამ ინდექსის მიხედვით, ველურ და კულტივირებულ ნიმუშებს შორის ხარისხობრივი განსხვავება არ იყო. თუმცა, ველურ ნიმუშებში სტეროლებისა და ფლავონოიდების საერთო შემცველობა მნიშვნელოვნად მაღალი იყო, ვიდრე კულტივირებულ ნიმუშებში. მეტაბოლომიკურმა შემდგომმა ანალიზმა გამოავლინა მეტაბოლიტების უხვი მრავალფეროვნება ველურ და კულტივირებულ ნიმუშებს შორის. გარდა ამისა, გამოიკვეთა 97 მნიშვნელოვნად განსხვავებული მეტაბოლიტი, რომლებიც ჩამოთვლილიადამატებითი ცხრილი S2ამ მნიშვნელოვნად განსხვავებულ მეტაბოლიტებს შორისაა β-სიტოსტეროლი (ID არის M397T42) და კვერცეტინის წარმოებულები (M447T204_2), რომლებიც, როგორც აღნიშნულია, აქტიურ ინგრედიენტებად არიან მიჩნეულნი. დიფერენციალურ მეტაბოლიტებს შორის ასევე შედიოდა აქამდე უცნობი შემადგენელი ნაწილები, როგორიცაა ტრიგონელინი (M138T291_2), ბეტაინი (M118T277_2), ფუსტინი (M269T36), როტენონი (M241T189), არქტიტინი (M557T165) და ლოგანის მჟავა (M399T284_2). ეს კომპონენტები სხვადასხვა როლს ასრულებენ ანტიოქსიდანტურ, ანთების საწინააღმდეგო, თავისუფალი რადიკალების შთანთქმის, კიბოს საწინააღმდეგო და ათეროსკლეროზის მკურნალობაში და, შესაბამისად, შეიძლება წარმოადგენდნენ YCH-ის სავარაუდო ახალ აქტიურ კომპონენტებს. აქტიური ინგრედიენტების შემცველობა განსაზღვრავს სამკურნალო მასალების ეფექტურობას და ხარისხს [7] შეჯამების სახით, მეთანოლის ექსტრაქტს, როგორც YCH-ის ხარისხის შეფასების ერთადერთ ინდექსს, გარკვეული შეზღუდვები აქვს და უფრო სპეციფიკური ხარისხის მარკერები შემდგომ შესწავლას საჭიროებს. ველურ და კულტივირებულ YCH-ს შორის მნიშვნელოვანი განსხვავებები იყო სტეროლების საერთო რაოდენობაში, ფლავონოიდებში და მრავალი სხვა დიფერენციალური მეტაბოლიტის შემცველობაში; ამიტომ, მათ შორის პოტენციურად არსებობდა გარკვეული ხარისხობრივი განსხვავებები. ამავდროულად, YCH-ში ახლად აღმოჩენილ პოტენციურ აქტიურ ინგრედიენტებს შეიძლება ჰქონდეთ მნიშვნელოვანი საცნობარო ღირებულება YCH-ის ფუნქციური საფუძვლის შესწავლისა და YCH რესურსების შემდგომი განვითარებისთვის.

ნამდვილი სამკურნალო მასალების მნიშვნელობა დიდი ხანია აღიარებულია წარმოშობის კონკრეტულ რეგიონში ჩინური მცენარეული მედიკამენტების შესანიშნავი ხარისხის წარმოებისთვის [8] მაღალი ხარისხი ნამდვილი სამკურნალო მასალების აუცილებელი ატრიბუტია, ხოლო ჰაბიტატი მნიშვნელოვანი ფაქტორია, რომელიც გავლენას ახდენს ასეთი მასალების ხარისხზე. მას შემდეგ, რაც YCH-ის გამოყენება დაიწყო, დიდი ხნის განმავლობაში მასში ველური YCH დომინირებდა. 1980-იან წლებში ნინგსიაში YCH-ის წარმატებული შეყვანისა და მოშინაურების შემდეგ, იინჩაიჰუს სამკურნალო მასალების წყარო თანდათან ველურიდან კულტივირებულ YCH-ზე გადავიდა. YCH-ის წყაროების შესახებ წინა კვლევის თანახმად [9] და ჩვენი კვლევითი ჯგუფის საველე კვლევის შედეგების მიხედვით, კულტივირებული და ველური სამკურნალო მასალების გავრცელების არეალში მნიშვნელოვანი განსხვავებებია. ველური YCH ძირითადად გავრცელებულია შანქსიის პროვინციის ნინგსია ჰუის ავტონომიურ რეგიონში, შიდა მონღოლეთის არიდული ზონისა და ცენტრალური ნინგსიის მიმდებარედ. კერძოდ, ამ რაიონებში უდაბნოს სტეპი YCH-ის ზრდის ყველაზე შესაფერისი ჰაბიტატია. ამის საპირისპიროდ, კულტივირებული YCH ძირითადად გავრცელებულია ველური გავრცელების არეალის სამხრეთით, როგორიცაა ტონგსინის ოლქი (კულტივირებული I) და მისი მიმდებარე ტერიტორიები, რომელიც ჩინეთში კულტივაციისა და წარმოების უდიდეს ბაზად იქცა, და პენგიანგის ოლქი (კულტივირებული II), რომელიც უფრო სამხრეთით მდებარეობს და კულტივირებული YCH-ის კიდევ ერთი წარმოების არეალია. უფრო მეტიც, ზემოთ ჩამოთვლილი ორი კულტივირებული ტერიტორიის ჰაბიტატები არ არის უდაბნოს სტეპი. ამიტომ, წარმოების რეჟიმის გარდა, ველური და კულტივირებული YCH-ის ჰაბიტატშიც მნიშვნელოვანი განსხვავებებია. ჰაბიტატი მნიშვნელოვანი ფაქტორია, რომელიც გავლენას ახდენს მცენარეული სამკურნალო მასალების ხარისხზე. სხვადასხვა ჰაბიტატი გავლენას მოახდენს მცენარეებში მეორადი მეტაბოლიტების ფორმირებასა და დაგროვებაზე, რითაც გავლენას ახდენს სამკურნალო პროდუქტების ხარისხზე [10,11] ამრიგად, ამ კვლევაში აღმოჩენილი ფლავონოიდების, სტეროლების საერთო შემცველობასა და 53 მეტაბოლიტის ექსპრესიაში მნიშვნელოვანი განსხვავებები შესაძლოა საველე მენეჯმენტისა და ჰაბიტატის განსხვავებების შედეგი იყოს.

ერთ-ერთი მთავარი გზა, რომლითაც გარემო გავლენას ახდენს სამკურნალო მასალების ხარისხზე, არის წყარო მცენარეებზე სტრესის მოხდენა. ზომიერი გარემო სტრესი, როგორც წესი, ასტიმულირებს მეორადი მეტაბოლიტების დაგროვებას [12,13]. ზრდა/დიფერენციაციის ბალანსის ჰიპოთეზა ამტკიცებს, რომ როდესაც საკვები ნივთიერებები საკმარისი რაოდენობითაა, მცენარეები ძირითადად იზრდებიან, ხოლო როდესაც საკვები ნივთიერებები დეფიციტურია, მცენარეები ძირითადად დიფერენცირდებიან და მეტ მეორად მეტაბოლიტს გამოიმუშავებენ [14]. წყლის დეფიციტით გამოწვეული გვალვის სტრესი არის მთავარი გარემო სტრესი, რომელსაც მცენარეები განიცდიან არიდულ რაიონებში. ამ კვლევაში, კულტივირებული YCH-ის წყლის მდგომარეობა უფრო უხვია, წლიური ნალექების დონე მნიშვნელოვნად მაღალია, ვიდრე ველური YCH-ის (Cultivated I-ის წყლის მარაგი დაახლოებით 2-ჯერ მეტი იყო, ვიდრე ველური; Cultivated II-ის - დაახლოებით 3.5-ჯერ მეტი, ვიდრე ველური). გარდა ამისა, ველურ გარემოში ნიადაგი ქვიშიანია, მაგრამ სასოფლო-სამეურნეო მიწებში ნიადაგი თიხიანია. თიხიან ნიადაგთან შედარებით, ქვიშიან ნიადაგს აქვს წყლის შეკავების სუსტი უნარი და უფრო მეტად ამძიმებს გვალვის სტრესს. ამავდროულად, კულტივაციის პროცესს ხშირად თან ახლდა მორწყვა, ამიტომ გვალვის სტრესის ხარისხი დაბალი იყო. ველური YCH იზრდება მკაცრ ბუნებრივ არიდულ ჰაბიტატებში და, შესაბამისად, შეიძლება განიცადოს უფრო სერიოზული გვალვის სტრესი.

ოსმორეგულაცია მნიშვნელოვანი ფიზიოლოგიური მექანიზმია, რომლითაც მცენარეები უმკლავდებიან გვალვის სტრესს, ხოლო ალკალოიდები მნიშვნელოვან ოსმოსურ რეგულატორებს წარმოადგენენ უმაღლეს მცენარეებში [15] ბეტაინები წყალში ხსნადი ალკალოიდური მეოთხეული ამონიუმის ნაერთებია და შეუძლიათ ოსმოპროტექტორების როლის შესრულება. გვალვის სტრესს შეუძლია შეამციროს უჯრედების ოსმოსური პოტენციალი, ხოლო ოსმოპროტექტორები ინარჩუნებენ და ინარჩუნებენ ბიოლოგიური მაკრომოლეკულების სტრუქტურასა და მთლიანობას და ეფექტურად ამსუბუქებენ გვალვის სტრესით გამოწვეულ მცენარეებზე მიყენებულ ზიანს [16] მაგალითად, გვალვის დროს, შაქრის ჭარხალსა და Lycium barbarum-ში ბეტაინის შემცველობა მნიშვნელოვნად გაიზარდა [17,18]. ტრიგონელინი უჯრედების ზრდის რეგულატორია და გვალვის სტრესის პირობებში მას შეუძლია გაახანგრძლივოს მცენარის უჯრედული ციკლის ხანგრძლივობა, შეაფერხოს უჯრედების ზრდა და გამოიწვიოს უჯრედის მოცულობის შემცირება. უჯრედში გახსნილი ნივთიერებების კონცენტრაციის შედარებითი ზრდა მცენარეს საშუალებას აძლევს მიაღწიოს ოსმოსურ რეგულირებას და გააძლიეროს გვალვის სტრესისადმი წინააღმდეგობის უნარი [19]. JIA X [20] აღმოჩნდა, რომ გვალვის სტრესის ზრდასთან ერთად, Astragalus membranaceus (ტრადიციული ჩინური მედიცინის წყარო) გამოიმუშავებს მეტ ტრიგონელს, რომელიც არეგულირებს ოსმოსურ პოტენციალს და აუმჯობესებს გვალვის სტრესისადმი წინააღმდეგობის უნარს. ასევე დადასტურებულია, რომ ფლავონოიდები მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ მცენარის გვალვისადმი მდგრადობაში [21,22]. კვლევების დიდმა რაოდენობამ დაადასტურა, რომ ზომიერი გვალვის სტრესი ხელს უწყობდა ფლავონოიდების დაგროვებას. ლანგ დუო-იონგი და სხვ. [23] შეადარა გვალვის სტრესის გავლენა YCH-ზე მინდორში წყლის შეკავების უნარის კონტროლით. აღმოჩნდა, რომ გვალვის სტრესი გარკვეულწილად აფერხებდა ფესვების ზრდას, მაგრამ საშუალო და ძლიერი გვალვის სტრესის დროს (მინდვრის წყლის შეკავების უნარის 40%), YCH-ში ფლავონოიდების საერთო შემცველობა იზრდებოდა. ამასობაში, გვალვის სტრესის დროს, ფიტოსტეროლებს შეუძლიათ იმოქმედონ უჯრედის მემბრანის სითხისა და გამტარიანობის რეგულირებაზე, წყლის დაკარგვის შეფერხებაზე და სტრესისადმი მდგრადობის გაუმჯობესებაზე [24,25] ამრიგად, ველურ YCH-ში ფლავონოიდების, სტეროლების, ბეტაინის, ტრიგონელინის და სხვა მეორადი მეტაბოლიტების დაგროვების ზრდა შესაძლოა დაკავშირებული იყოს მაღალი ინტენსივობის გვალვის სტრესთან.

ამ კვლევაში, KEGG გზის გამდიდრების ანალიზი ჩატარდა მეტაბოლიტებზე, რომლებიც მნიშვნელოვნად განსხვავდებოდა ველურ და კულტივირებულ YCH-ს შორის. გამდიდრებული მეტაბოლიტები მოიცავდა ასკორბატისა და ალდარატის მეტაბოლიზმის, ამინოაცილ-tRNA ბიოსინთეზის, ჰისტიდინის მეტაბოლიზმის და ბეტა-ალანინის მეტაბოლიზმის გზებში ჩართულ მეტაბოლურ გზებს. ეს მეტაბოლური გზები მჭიდრო კავშირშია მცენარის სტრესისადმი რეზისტენტობის მექანიზმებთან. მათ შორის, ასკორბატის მეტაბოლიზმი მნიშვნელოვან როლს ასრულებს მცენარის ანტიოქსიდანტების წარმოებაში, ნახშირბადისა და აზოტის მეტაბოლიზმში, სტრესისადმი რეზისტენტობასა და სხვა ფიზიოლოგიურ ფუნქციებში [26]; ამინოაცილ-tRNA ბიოსინთეზი ცილის წარმოქმნის მნიშვნელოვანი გზაა [27,28], რომელიც მონაწილეობს სტრესისადმი მდგრადი ცილების სინთეზში. როგორც ჰისტიდინის, ასევე β-ალანინის გზებს შეუძლიათ გააძლიერონ მცენარის ტოლერანტობა გარემო სტრესის მიმართ [29,30] ეს კიდევ ერთხელ მიუთითებს, რომ ველურ და კულტივირებულ YCH-ს შორის მეტაბოლიტების განსხვავებები მჭიდრო კავშირში იყო სტრესისადმი მდგრადობის პროცესებთან.

ნიადაგი სამკურნალო მცენარეების ზრდისა და განვითარების მატერიალური საფუძველია. ნიადაგში არსებული აზოტი (N), ფოსფორი (P) და კალიუმი (K) მცენარეების ზრდისა და განვითარების მნიშვნელოვანი საკვები ელემენტებია. ნიადაგის ორგანული ნივთიერება ასევე შეიცავს N-ს, P-ს, K-ს, Zn-ს, Ca-ს, Mg-ს და სხვა მაკროელემენტებსა და მიკროელემენტებს, რომლებიც აუცილებელია სამკურნალო მცენარეებისთვის. საკვები ნივთიერებების ჭარბი ან დეფიციტი, ან საკვები ნივთიერებების არაბალანსირებული თანაფარდობა გავლენას ახდენს სამკურნალო მასალების ზრდა-განვითარებაზე და ხარისხზე, და სხვადასხვა მცენარეს განსხვავებული საკვები ნივთიერებების მოთხოვნილებები აქვს [31,32,33] მაგალითად, დაბალი აზოტის შემცველობა ხელს უწყობდა ალკალოიდების სინთეზს Isatis indigotica-ში და სასარგებლო იყო ფლავონოიდების დაგროვებისთვის ისეთ მცენარეებში, როგორიცაა Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge და Dichondra repens Forst. ამის საპირისპიროდ, ზედმეტმა აზოტმა შეაფერხა ფლავონოიდების დაგროვება ისეთ სახეობებში, როგორიცაა Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis და Ginkgo biloba და გავლენა მოახდინა სამკურნალო მასალების ხარისხზე [34]. ფოსფორის სასუქის გამოყენება ეფექტური იყო ურალის ძირტკბილაში გლიცირიზის მჟავისა და დიჰიდროაცეტონის შემცველობის გაზრდისთვის [35]. როდესაც გამოყენების რაოდენობამ 0.12 კგ.მ−2-ს გადააჭარბა, Tussilago farfara-ში ფლავონოიდების საერთო შემცველობა შემცირდა [36] ფოსფორის სასუქის გამოყენებამ უარყოფითი გავლენა მოახდინა ტრადიციული ჩინური მედიცინის rhizoma polygonati-ში პოლისაქარიდების შემცველობაზე [37], მაგრამ K სასუქი ეფექტური იყო საპონინების შემცველობის გაზრდაში [38] ორწლიანი Panax notoginseng-ის ზრდისა და საპონინების დაგროვებისთვის საუკეთესო იყო 450 კგ·hm−2 K სასუქის გამოყენება [39]. N:P:K = 2:2:1 თანაფარდობის შემთხვევაში, ჰიდროთერმული ექსტრაქტის, ჰარპაგიდის და ჰარპაგოზიდის საერთო რაოდენობა ყველაზე მაღალი იყო [40]. N, P და K-ს მაღალი თანაფარდობა დადებითად მოქმედებდა Pogostemon cablin-ის ზრდის ხელშეწყობასა და აქროლადი ზეთის შემცველობის გაზრდაზე. N, P და K-ს დაბალი თანაფარდობა ზრდიდა Pogostemon cablin-ის ღეროს ფოთლის ზეთის ძირითადი ეფექტური კომპონენტების შემცველობას [41] YCH უნაყოფო ნიადაგისადმი მდგრადი მცენარეა და შესაძლოა, მას ჰქონდეს სპეციფიკური მოთხოვნილებები საკვები ნივთიერებების მიმართ, როგორიცაა N, P და K. ამ კვლევაში, კულტივირებულ YCH-თან შედარებით, ველური YCH მცენარეების ნიადაგი შედარებით უნაყოფო იყო: ორგანული ნივთიერებების, საერთო აზოტის, საერთო ფოსფორის და საერთო კალიუმის შემცველობა ნიადაგში, შესაბამისად, დაახლოებით 1/10, 1/2, 1/3 და 1/3 იყო კულტივირებული მცენარეების შემცველობისა. ამიტომ, ნიადაგის საკვები ნივთიერებების სხვაობა შეიძლება იყოს კიდევ ერთი მიზეზი კულტივირებულ და ველურ YCH-ში აღმოჩენილ მეტაბოლიტებს შორის არსებული განსხვავებებისა. ვეიბაო მა და სხვ. [42] აღმოჩნდა, რომ აზოტისა და ფოსფორის შემცველი სასუქის გარკვეული რაოდენობის გამოყენებამ მნიშვნელოვნად გააუმჯობესა თესლის მოსავლიანობა და ხარისხი. თუმცა, საკვები ელემენტების გავლენა YCH-ის ხარისხზე არ არის ნათელი და სამკურნალო მასალების ხარისხის გასაუმჯობესებლად განოყიერების ზომები შემდგომ შესწავლას საჭიროებს.

ჩინურ მცენარეულ მედიკამენტებს ახასიათებთ შემდეგი მახასიათებლები: „ხელსაყრელი ჰაბიტატები ხელს უწყობს მოსავლიანობას, ხოლო არახელსაყრელი ჰაბიტატები აუმჯობესებს ხარისხს“ [43] ველური YCH-დან კულტივირებულზე თანდათანობითი გადასვლის პროცესში, მცენარეების ჰაბიტატი მშრალი და უნაყოფო უდაბნოს სტეპიდან ნაყოფიერ სასოფლო-სამეურნეო მიწებად შეიცვალა, სადაც უფრო უხვი წყალია. კულტივირებული YCH-ის ჰაბიტატი უფრო მაღალია და მოსავლიანობაც უფრო მაღალი, რაც ბაზრის მოთხოვნის დაკმაყოფილებას უწყობს ხელს. თუმცა, ამ უკეთესმა ჰაბიტატმა YCH-ის მეტაბოლიტების მნიშვნელოვანი ცვლილებები გამოიწვია; ხელს უწყობს თუ არა ეს YCH-ის ხარისხის გაუმჯობესებას და როგორ მივაღწიოთ YCH-ის მაღალი ხარისხის წარმოებას მეცნიერებაზე დაფუძნებული კულტივაციის ზომების მეშვეობით, შემდგომ კვლევას მოითხოვს.

სიმულაციური ჰაბიტატის კულტივაცია არის ველური სამკურნალო მცენარეების ჰაბიტატისა და გარემო პირობების სიმულირების მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია მცენარეების კონკრეტული გარემო სტრესებისადმი გრძელვადიანი ადაპტაციის ცოდნაზე [43]. ველურ მცენარეებზე, განსაკუთრებით კი ავთენტური სამკურნალო მასალების წყაროდ გამოყენებული მცენარეების თავდაპირველ ჰაბიტატზე მოქმედი სხვადასხვა გარემო ფაქტორების სიმულირებით, მიდგომა იყენებს სამეცნიერო დიზაინს და ინოვაციურ ადამიანის ჩარევას ჩინური სამკურნალო მცენარეების ზრდისა და მეორადი მეტაბოლიზმის დასაბალანსებლად [43] მეთოდის მიზანია მაღალი ხარისხის სამკურნალო მასალების შემუშავების ოპტიმალური ღონისძიებების მიღწევა. სიმულაციური ჰაბიტატის კულტივაცია უნდა უზრუნველყოფდეს YCH-ის მაღალი ხარისხის წარმოების ეფექტურ გზას, მაშინაც კი, როდესაც ფარმაკოდინამიკური საფუძველი, ხარისხის მარკერები და გარემო ფაქტორებზე რეაგირების მექანიზმები ბუნდოვანია. შესაბამისად, ჩვენ ვთავაზობთ, რომ YCH-ის კულტივაციისა და წარმოების სამეცნიერო დიზაინისა და საველე მართვის ზომები უნდა განხორციელდეს ველური YCH-ის გარემოსდაცვითი მახასიათებლების გათვალისწინებით, როგორიცაა მშრალი, უნაყოფო და ქვიშიანი ნიადაგის პირობები. ამავდროულად, იმედია, რომ მკვლევარები ჩაატარებენ უფრო სიღრმისეულ კვლევას YCH-ის ფუნქციური მასალის საფუძვლისა და ხარისხის მარკერების შესახებ. ამ კვლევებს შეუძლიათ უზრუნველყონ YCH-ის უფრო ეფექტური შეფასების კრიტერიუმები და ხელი შეუწყონ მაღალი ხარისხის წარმოებას და ინდუსტრიის მდგრად განვითარებას.

დეტალი
მცენარეული ფრუქტუს ამომის ზეთი, ნატურალური მასაჟის დიფუზორები 1 კგ, ამომუმ ვილოსუმის ეთერზეთი

Zingiberaceae-ს ოჯახი სულ უფრო მეტ ყურადღებას იპყრობს ალელოპათიურ კვლევებში, მისი წევრი სახეობების მდიდარი აქროლადი ზეთებისა და არომატულობის გამო. წინა კვლევებმა აჩვენა, რომ Curcuma zedoaria-ს (ზედოარი) ქიმიკატები [40], Alpinia zerumbet (სსრკ.) BLBurtt & RMSm. [41] და Zingiber officinale Rosc. [42] კოჭას ოჯახის წარმომადგენლებს აქვთ ალელოპათიური გავლენა სიმინდის, სალათის ფურცლისა და პომიდვრის თესლის აღმოცენებასა და ნერგების ზრდაზე. ჩვენი მიმდინარე კვლევა წარმოადგენს პირველ ანგარიშს A. villosum-ის (Zingiberaceae ოჯახის წევრი) ღეროებიდან, ფოთლებიდან და ახალგაზრდა ნაყოფებიდან აქროლადი ნივთიერებების ალელოპათიურ აქტივობაზე. ღეროების, ფოთლებისა და ახალგაზრდა ნაყოფების ზეთის მოსავლიანობა შესაბამისად 0.15%, 0.40% და 0.50% იყო, რაც მიუთითებს, რომ ნაყოფში უფრო მეტი რაოდენობით აქროლადი ზეთები გამოიმუშავეს, ვიდრე ღეროებსა და ფოთლებში. ღეროებიდან აქროლადი ზეთების ძირითადი კომპონენტები იყო β-პინენი, β-ფელანდრენი და α-პინენი, რაც მსგავსი იყო ფოთლის ზეთის ძირითადი ქიმიური ნივთიერებების, β-პინენის და α-პინენის (მონოტერპენული ნახშირწყალბადები) ნიმუშისა. მეორეს მხრივ, ახალგაზრდა ნაყოფებში ზეთი მდიდარი იყო ბორნილის აცეტატით და კამფორით (ჟანგბადით გაჯერებული მონოტერპენები). შედეგებს ადასტურებდა Do N Dai-ს [30,32] და ჰუი აო [31] რომლებმაც A. villosum-ის სხვადასხვა ორგანოდან ზეთები იდენტიფიცირეს.

არსებობს რამდენიმე ცნობა ამ ძირითადი ნაერთების სხვა სახეობებში მცენარის ზრდის ინჰიბიტორული აქტივობის შესახებ. შალინდერ კაურმა აღმოაჩინა, რომ ევკალიპტის α-პინენმა მნიშვნელოვნად შეამცირა Amaranthus viridis L.-ის ფესვის სიგრძე და ყლორტების სიმაღლე 1.0 μL კონცენტრაციისას [43] და კიდევ ერთმა კვლევამ აჩვენა, რომ α-პინენი აფერხებდა ფესვის ადრეულ ზრდას და იწვევდა ფესვის ქსოვილში ჟანგვით დაზიანებას რეაქტიული ჟანგბადის სახეობების გენერაციის გაზრდის გზით [44] ზოგიერთ ანგარიშში აღნიშნულია, რომ β-პინენი დოზადამოკიდებული რეაქციის გზით აფერხებდა სატესტო სარეველების აღმოცენებას და ნერგების ზრდას მემბრანის მთლიანობის დარღვევით [45], რაც ცვლის მცენარის ბიოქიმიას და აძლიერებს პეროქსიდაზებისა და პოლიფენოლ ოქსიდაზების აქტივობას [46] β-ფელანდრენმა Vigna unguiculata (L.) Walp-ის აღმოცენებისა და ზრდის მაქსიმალური ინჰიბირება 600 ppm კონცენტრაციისას აჩვენა [47], მაშინ როდესაც 250 მგ/მ3 კონცენტრაციის დროს კამფორამ Lepidium sativum L.-ის ფესვისა და ყლორტების ზრდა დათრგუნა. [48] თუმცა, ბორნილის აცეტატის ალელოპათიური ეფექტის შესახებ კვლევები მწირია. ჩვენს კვლევაში, β-პინენის, ბორნილის აცეტატის და კამფორის ალელოპათიური ეფექტი ფესვის სიგრძეზე უფრო სუსტი იყო, ვიდრე აქროლადი ზეთების შემთხვევაში, გარდა α-პინენისა, მაშინ როდესაც ფოთლის ზეთი, რომელიც მდიდარია α-პინენით, ასევე უფრო ფიტოტოქსიკური იყო, ვიდრე A. villosum-ის ღეროებისა და ნაყოფის შესაბამისი აქროლადი ზეთები. ორივე დასკვნა მიუთითებს, რომ α-პინენი შეიძლება იყოს ამ სახეობის ალელოპათიის მნიშვნელოვანი ქიმიური ნივთიერება. ამავდროულად, შედეგები ასევე მიუთითებს, რომ ნაყოფის ზეთში არსებული ზოგიერთი ნაერთი, რომელიც არ იყო უხვად, შეიძლება ხელს უწყობდეს ფიტოტოქსიკური ეფექტის წარმოქმნას, დასკვნა, რომელიც მომავალში შემდგომ კვლევას საჭიროებს.

ნორმალურ პირობებში, ალელოქიმიკატების ალელოპათიური ეფექტი სახეობრივად სპეციფიკურია. ჯიანგმა და სხვებმა აღმოაჩინეს, რომ Artemisia sieversiana-ს მიერ წარმოებული ეთერზეთი უფრო ძლიერ გავლენას ახდენს Amaranthus retroflexus L.-ზე, ვიდრე Medicago sativa L.-ზე, Poa annua L.-ზე და Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng-ზე. [49] სხვა კვლევაში, Lavandula angustifolia Mill.-ის აქროლადმა ზეთმა სხვადასხვა ხარისხის ფიტოტოქსიკური ეფექტი გამოიწვია მცენარის სხვადასხვა სახეობაზე. Lolium multiflorum Lam. იყო ყველაზე მგრძნობიარე აქცეპტორი სახეობა, ჰიპოკოტილისა და ფესვის ზრდა შეფერხდა შესაბამისად 87.8%-ით და 76.7%-ით, 1 μL/მლ ზეთების დოზით, მაგრამ კიტრის ნერგების ჰიპოკოტილის ზრდაზე გავლენა თითქმის არ მოუხდენია [20] ჩვენი შედეგები ასევე აჩვენებს, რომ L. sativa-სა და L. perenne-ს შორის A. villosum-ის აქროლადი ნივთიერებების მიმართ მგრძნობელობა განსხვავებულია.

ერთი და იგივე სახეობის აქროლადი ნაერთები და ეთერზეთები შეიძლება განსხვავდებოდეს რაოდენობრივად და/ან ხარისხობრივად ზრდის პირობების, მცენარის ნაწილებისა და აღმოჩენის მეთოდების გამო. მაგალითად, ერთ-ერთმა ანგარიშმა აჩვენა, რომ პირანოიდი (10.3%) და β-კარიოფილენი (6.6%) იყო Sambucus nigra-ს ფოთლებიდან გამოყოფილი აქროლადი ნივთიერებების ძირითადი ნაერთები, მაშინ როდესაც ბენზალდეჰიდი (17.8%), α-ბულნესენი (16.6%) და ტეტრაკოზანი (11.5%) უხვად იყო ფოთლებიდან ამოღებულ ზეთებში [50] ჩვენს კვლევაში, ახალი მცენარეული მასალების მიერ გამოყოფილ აქროლად ნაერთებს ექსპერიმენტულ მცენარეებზე უფრო ძლიერი ალელოპათიური ეფექტი ჰქონდათ, ვიდრე ექსტრაგირებულ აქროლად ზეთებს, რეაქციის განსხვავებები მჭიდრო კავშირშია ორ პრეპარატში არსებული ალელოქიმიკატების განსხვავებებთან. აქროლად ნაერთებსა და ზეთებს შორის ზუსტი განსხვავებები შემდგომ ექსპერიმენტებში დამატებით შესწავლას საჭიროებს.

ნიადაგის ნიმუშებში, რომლებშიც აქროლადი ზეთები იყო დამატებული, მიკრობული მრავალფეროვნებისა და მიკრობული საზოგადოების სტრუქტურის განსხვავებები დაკავშირებული იყო მიკროორგანიზმებს შორის კონკურენციასთან, ასევე ნებისმიერ ტოქსიკურ ეფექტთან და აქროლადი ზეთების ნიადაგში ყოფნის ხანგრძლივობასთან. ვოკოუ და ლიოტირი [51] აღმოჩნდა, რომ ოთხი ეთერზეთის (0.1 მლ) კულტივირებულ ნიადაგში (150 გ) შესაბამისი გამოყენება ააქტიურებდა ნიადაგის ნიმუშების სუნთქვას, მიუხედავად იმისა, რომ ზეთები განსხვავდებოდა მათი ქიმიური შემადგენლობით, რაც იმაზე მიუთითებს, რომ მცენარეული ზეთები გამოიყენება ნახშირბადის და ენერგიის წყაროდ ნიადაგის მიკროორგანიზმების მიერ. ამჟამინდელი კვლევიდან მიღებული მონაცემები ადასტურებს, რომ A. villosum-ის მთელი მცენარის ზეთებმა ხელი შეუწყო ნიადაგის სოკოვანი სახეობების რაოდენობის აშკარა ზრდას ზეთის დამატებით მე-14 დღისთვის, რაც მიუთითებს, რომ ზეთი შეიძლება ნახშირბადის წყარო იყოს ნიადაგის მეტი სოკოსთვის. კიდევ ერთმა კვლევამ აჩვენა დასკვნა: ნიადაგის მიკროორგანიზმებმა აღადგინეს თავიანთი საწყისი ფუნქცია და ბიომასა Thymbra capitata L. (Cav) ზეთის დამატებით გამოწვეული ვარიაციის დროებითი პერიოდის შემდეგ, მაგრამ ზეთი ყველაზე მაღალი დოზით (0.93 µლ ზეთი ნიადაგის გრამზე) არ აძლევდა ნიადაგის მიკროორგანიზმებს საწყისი ფუნქციონალურობის აღდგენის საშუალებას [52]. ამჟამინდელ კვლევაში, სხვადასხვა დღეებითა და კონცენტრაციებით დამუშავების შემდეგ ნიადაგის მიკრობიოლოგიური ანალიზის საფუძველზე, ჩვენ ვივარაუდეთ, რომ ნიადაგის ბაქტერიული საზოგადოება აღდგებოდა მეტი დღის შემდეგ. ამის საპირისპიროდ, სოკოვანი მიკრობიოტა ვერ დაუბრუნდება თავის საწყის მდგომარეობას. შემდეგი შედეგები ადასტურებს ამ ჰიპოთეზას: ზეთის მაღალი კონცენტრაციის მკაფიო გავლენა ნიადაგის სოკოვანი მიკრობიომის შემადგენლობაზე გამოვლინდა ძირითადი კოორდინატების ანალიზით (PCoA), ხოლო სითბური რუკის პრეზენტაციებმა კიდევ ერთხელ დაადასტურა, რომ 3.0 მგ/მლ ზეთით (კერძოდ, 0.375 მგ ზეთი ნიადაგის გრამზე) დამუშავებული ნიადაგის სოკოვანი საზოგადოების შემადგენლობა გვარის დონეზე მნიშვნელოვნად განსხვავდებოდა სხვა დამუშავებებისგან. ამჟამად, მონოტერპენული ნახშირწყალბადების ან ჟანგბადიანი მონოტერპენების დამატების გავლენის შესახებ ნიადაგის მიკრობულ მრავალფეროვნებასა და საზოგადოების სტრუქტურაზე კვლევა ჯერ კიდევ მწირია. რამდენიმე კვლევამ აჩვენა, რომ α-პინენი ზრდიდა ნიადაგის მიკრობულ აქტივობას და მეთილოფილასებრთა (მეთილოტროფების ჯგუფი, პროტეობაქტერიები) შედარებით სიმრავლეს დაბალი ტენიანობის პირობებში, მნიშვნელოვან როლს ასრულებს, როგორც ნახშირბადის წყარო მშრალ ნიადაგებში [53] ანალოგიურად, A. villosum-ის მთლიანი მცენარის აქროლადი ზეთი, რომელიც შეიცავს 15.03% α-პინენს (დამატებითი ცხრილი S1), აშკარად გაზარდა Proteobacteria-ს ფარდობითი სიმრავლე 1.5 მგ/მლ და 3.0 მგ/მლ-მდე, რაც იმაზე მიუთითებს, რომ α-პინენი შესაძლოა ნიადაგის მიკროორგანიზმებისთვის ნახშირბადის ერთ-ერთი წყარო იყოს.

A. villosum-ის სხვადასხვა ორგანოს მიერ გამომუშავებულ აქროლად ნაერთებს L. sativa-სა და L. perenne-ზე ალელოპათიური ეფექტების სხვადასხვა ხარისხი ჰქონდათ, რაც მჭიდრო კავშირში იყო A. villosum-ის მცენარის ნაწილების ქიმიურ შემადგენლობასთან. მიუხედავად იმისა, რომ აქროლადი ზეთის ქიმიური შემადგენლობა დადასტურდა, A. villosum-ის მიერ ოთახის ტემპერატურაზე გამოყოფილი აქროლადი ნაერთები უცნობია, რაც შემდგომ კვლევას საჭიროებს. გარდა ამისა, სხვადასხვა ალელოქიმიკატებს შორის სინერგიული ეფექტიც გასათვალისწინებელია. ნიადაგის მიკროორგანიზმების თვალსაზრისით, აქროლადი ზეთის ნიადაგის მიკროორგანიზმებზე ზემოქმედების ყოვლისმომცველი შესწავლისთვის, ჩვენ კვლავ გვჭირდება უფრო სიღრმისეული კვლევის ჩატარება: აქროლადი ზეთის დამუშავების დროის გახანგრძლივება და ნიადაგში სხვადასხვა დღეს აქროლადი ზეთის ქიმიური შემადგენლობის ვარიაციების გარჩევა.

დეტალი
სუფთა Artemisia capillaris ზეთი სანთლისა და საპნის დასამზადებლად საბითუმო დიფუზორის ეთერზეთი ახალი ლერწმის სანთურის დიფუზორებისთვის

მღრღნელის მოდელის დიზაინი

ცხოველები შემთხვევითობის პრინციპით დაიყვნენ ხუთ ჯგუფად, თითოეულში თხუთმეტი თაგვისგან შემდგარ. საკონტროლო ჯგუფის და სამოდელო ჯგუფის თაგვებს ზონდი ჩაუტარდათ.სეზამის ზეთი6 დღის განმავლობაში. დადებითი კონტროლის ჯგუფის თაგვებს 6 დღის განმავლობაში ბიფენდატის ტაბლეტებით (BT, 10 მგ/კგ) ზონდი ჩაუტარდათ. ექსპერიმენტულ ჯგუფებს 6 დღის განმავლობაში სეზამის ზეთში გახსნილი 100 მგ/კგ და 50 მგ/კგ AEO-თი მკურნალობდნენ. მე-6 დღეს, საკონტროლო ჯგუფს სეზამის ზეთი მიეცა, ხოლო ყველა სხვა ჯგუფს სეზამის ზეთში 0.2%-იანი CCl4-ის ერთჯერადი დოზა (10 მლ/კგ) შეჰყავდათ.ინტრაპერიტონეალური ინექციაშემდეგ თაგვები უწყლოდ იყვნენ უზმოზე და სისხლის ნიმუშები აღებული იქნა რეტრობულბარული სისხლძარღვებიდან; შეგროვებული სისხლი ცენტრიფუგირდა 3000 × სიჩქარით.g10 წუთის განმავლობაში შრატის გამოსაყოფად.საშვილოსნოს ყელის დისლოკაციასისხლის აღებისთანავე ჩატარდა კვლევა და ღვიძლის ნიმუშები დაუყოვნებლივ იქნა აღებული. ღვიძლის ნიმუშის ერთი ნაწილი ანალიზამდე დაუყოვნებლივ შეინახეს -20°C ტემპერატურაზე, ხოლო მეორე ნაწილი ამოკვეთეს და 10%-იან კონტეინერში დააფიქსირეს.ფორმალინიხსნარი; დარჩენილი ქსოვილები ჰისტოპათოლოგიური ანალიზისთვის -80°C ტემპერატურაზე ინახებოდა (ვანგი და სხვ., 2008,ჰსუ და სხვ., 2009,ნიე და სხვ., 2015).

შრატში ბიოქიმიური პარამეტრების გაზომვა

ღვიძლის დაზიანება შეფასდა შეფასებითფერმენტული აქტივობებიშრატის ALT და AST-ის განსაზღვრა შესაბამისი კომერციული ნაკრებების გამოყენებით, ნაკრებების ინსტრუქციის მიხედვით (ნანკინი, ძიანგსუს პროვინცია, ჩინეთი). ფერმენტული აქტივობები გამოისახა ლიტრზე ერთეულებში (U/l).

MDA-ს, SOD-ის, GSH-ის და GSH-P-ის გაზომვაxღვიძლის ჰომოგენატებში

ღვიძლის ქსოვილები ჰომოგენიზებული იქნა ცივი ფიზიოლოგიური ხსნარით 1:9 თანაფარდობით (w/v, ღვიძლი:ფიზიოლოგიური ხსნარი). ჰომოგენატები ცენტრიფუგირებული იყო (2500 ×g10 წუთის განმავლობაში) შემდგომი განსაზღვრისთვის ზედაპირული ნივთიერებების შესაგროვებლად. ღვიძლის დაზიანება შეფასდა MDA-სა და GSH-ის დონეების ღვიძლისმიერი გაზომვების, ასევე SOD-ისა და GSH-P-ის მიხედვით.xაქტივობები. ყველა ეს მაჩვენებელი განისაზღვრა ნაკრებზე მითითებული ინსტრუქციის შესაბამისად (ნანკინი, ძიანგსუს პროვინცია, ჩინეთი). MDA-სა და GSH-ის შედეგები გამოხატული იყო ნმოლ/მგ ცილაზე (ნმოლ/მგ პროტეინი), ხოლო SOD-სა და GSH-P-ის აქტივობებიxგამოხატული იყო, როგორც U თითო მგ ცილაზე (U/მგ პროტეინი).

ჰისტოპათოლოგიური ანალიზი

ახლად მიღებული ღვიძლის ნაწილები ფიქსირებული იყო 10%-იან ბუფერულ კონტეინერში.პარაფორმალდეჰიდიფოსფატის ხსნარი. შემდეგ ნიმუში ჩაასხეს პარაფინში, დაჭრეს 3–5 მკმ ნაჭრებად და შეღებესჰემატოქსილინიდაეოზინი(H&E) სტანდარტული პროცედურის მიხედვით და საბოლოოდ გაანალიზებულიასინათლის მიკროსკოპია(ტიანი და სხვ., 2012).

სტატისტიკური ანალიზი

შედეგები გამოისახა, როგორც საშუალო ± სტანდარტული გადახრა (SD). შედეგები გაანალიზდა სტატისტიკური პროგრამის SPSS Statistics-ის, 19.0 ვერსიის გამოყენებით. მონაცემებს ჩაუტარდა ვარიაციის ანალიზი (ANOVA,p< 0.05), რასაც მოჰყვა დანეტის ტესტი და დანეტის T3 ტესტი სხვადასხვა ექსპერიმენტული ჯგუფების მნიშვნელობებს შორის სტატისტიკურად მნიშვნელოვანი განსხვავებების დასადგენად. მნიშვნელოვანი განსხვავება განიხილებოდა შემდეგ დონეზე:p< 0.05.

შედეგები და განხილვა

AEO-ს შემადგენელი ნაწილები

გაზის გაზური/მასშტაბიანი ტომოგრაფიის ანალიზის შედეგად, აღმოჩნდა, რომ AEO შეიცავდა 25 შემადგენელ ნივთიერებას, რომლებიც გამოიყო 10-დან 35 წუთამდე და იდენტიფიცირებული იქნა 21 შემადგენელი ნივთიერება, რომელიც ეთერზეთის 84%-ს შეადგენს (ცხრილი 1). შემავალი აქროლადი ზეთიმონოტერპენოიდები(80.9%), სესკვიტერპენოიდები (9.5%), ნაჯერი დაუტოტელი ნახშირწყალბადები (4.86%) და სხვადასხვა აცეტილენი (4.86%). სხვა კვლევებთან შედარებით (გუო და სხვ., 2004), AEO-ში უხვად აღმოვაჩინეთ მონოტერპენოიდები (80.90%). შედეგებმა აჩვენა, რომ AEO-ს ყველაზე უხვად შემადგენელი ნაწილია β-ციტრონელოლი (16.23%). AEO-ს სხვა ძირითადი კომპონენტებია 1,8-ცინეოლი (13.9%),კამფორა(12.59%),ლინალოოლი(11.33%), α-პინენი (7.21%), β-პინენი (3.99%),თიმოლი(3.22%), დამირცენი(2.02%). ქიმიური შემადგენლობის ვარიაცია შესაძლოა დაკავშირებული იყოს იმ გარემო პირობებთან, რომლებზეც მცენარე იმყოფებოდა, როგორიცაა მინერალური წყალი, მზის შუქი, განვითარების სტადია დაკვება.

დეტალი
სუფთა საპოშნიკოვია დივარიკატას ზეთი სანთლისა და საპნის დასამზადებლად, საბითუმო დიფუზორის ეთერზეთი, ახალი ლერწმის სანთურის დიფუზორებისთვის

2.1. SDE-ს მომზადება

SD-ს რიზომები შეძენილი იქნა გამხმარი ბალახეულის სახით Hanherb Co.-სგან (გური, კორეა). მცენარეული მასალები ტაქსონომიურად დაადასტურა კორეის აღმოსავლური მედიცინის ინსტიტუტის (KIOM) დოქტორმა გო-ია ჩოიმ. ვაუჩერის ნიმუში (ნომერი 2014 SDE-6) განთავსებული იქნა სტანდარტული მცენარეული რესურსების კორეულ ჰერბარიუმში. SD-ს გამხმარი რიზომები (320 გ) ორჯერ იქნა ექსტრაგირებული 70%-იანი ეთანოლით (2 საათიანი რეფლუქსით) და ექსტრაქტი შემდეგ კონცენტრირებული იქნა შემცირებული წნევის ქვეშ. ნაყენი გაფილტრული, ლიოფილიზებული და შენახული იქნა 4°C ტემპერატურაზე. ნედლი საწყისი მასალებიდან გამომშრალი ექსტრაქტის მოსავლიანობა იყო 48.13% (წონა/წონა).

2.2. რაოდენობრივი მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის (HPLC) ანალიზი

ქრომატოგრაფიული ანალიზი ჩატარდა HPLC სისტემით (Waters Co., მილფორდი, მასაჩუსეტსი, აშშ) და ფოტოდიოდური მასივის დეტექტორით. SDE-ს HPLC ანალიზისთვის, პრაიმ-O-გლუკოზილციმიფუგინის სტანდარტი შეძენილი იქნა ტრადიციული მედიცინის ინდუსტრიის კორეის ხელშეწყობის ინსტიტუტისგან (გიონგსანი, კორეა) დაწმ-ო-გლუკოზილჰამაუდოლი და 4′-O-β-D-გლუკოზილ-5-Oმეთილვისამინოლი იზოლირებული იქნა ჩვენს ლაბორატორიაში და იდენტიფიცირებული იქნა სპექტრული ანალიზით, ძირითადად NMR და MS მეთოდებით.

SDE ნიმუშები (0.1 მგ) გახსნილი იქნა 70%-იან ეთანოლში (10 მლ). ქრომატოგრაფიული გამოყოფა ჩატარდა XSelect HSS T3 C18 სვეტით (4.6 × 250 მმ, 5μმ, Waters Co., მილფორდი, მასაჩუსეტსი, აშშ). მობილური ფაზა შედგებოდა აცეტონიტრილისგან (A) და 0.1% ძმარმჟავისგან წყალში (B) 1.0 მლ/წთ ნაკადის სიჩქარით. გამოყენებული იყო მრავალსაფეხურიანი გრადიენტის პროგრამა შემდეგნაირად: 5% A (0 წთ), 5–20% A (0–10 წთ), 20% A (10–23 წთ) და 20–65% A (23–40 წთ). აღმოჩენის ტალღის სიგრძე დასკანირებული იყო 210–400 ნმ-ზე და ჩაწერილი იყო 254 ნმ-ზე. ინექციის მოცულობა იყო 10.0μლ. სამი ქრომონის განსაზღვრის სტანდარტული ხსნარები მომზადდა 7.781 მგ/მლ საბოლოო კონცენტრაციით (პრიმ-O-გლუკოზილციმიფუგინი), 31.125 მგ/მლ (4′-O-β-D-გლუკოზილ-5-O-მეთილვისამინოლი), და 31.125 მგ/მლ (წმ-ო-გლუკოზილჰამაუდოლი) მეთანოლში და ინახება 4°C ტემპერატურაზე.

2.3. ანთების საწინააღმდეგო აქტივობის შეფასებაინ ვიტრო

2.3.1. უჯრედის კულტურა და ნიმუშის დამუშავება

RAW 264.7 უჯრედები მიღებული იქნა ამერიკული ტიპური კულტურების კოლექციიდან (ATCC, მანასასი, ვირჯინია, აშშ) და გაიზარდა DMEM გარემოში, რომელიც შეიცავდა 1%-იან ანტიბიოტიკებს და 5.5%-იან FBS-ს. უჯრედები ინკუბირებული იქნა 5%-იანი CO2-ის ნოტიო ატმოსფეროში 37°C ტემპერატურაზე. უჯრედების სტიმულირებისთვის, გარემო შეიცვალა ახალი DMEM გარემოთი და ლიპოპოლისაქარიდით (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., სენტ-ლუისი, მისური, აშშ) 1°C ტემპერატურაზე.μგ/მლ დაემატა SDE-ს (200 ან 400) არსებობისას ან არარსებობისასμგ/მლ) დამატებით 24 საათის განმავლობაში.

2.3.2. აზოტის ოქსიდის (NO), პროსტაგლანდინ E2-ის (PGE2) და სიმსივნის ნეკროზის ფაქტორის განსაზღვრაα(TNF-α), და ინტერლეიკინ-6-ის (IL-6) წარმოება

უჯრედები დამუშავდა SDE-თი და სტიმულირებული იქნა LPS-ით 24 საათის განმავლობაში. NO-ს წარმოება გაანალიზდა ნიტრიტის გაზომვით გრიესის რეაგენტის გამოყენებით, წინა კვლევის მიხედვით [12]. ანთებითი ციტოკინების PGE2, TNF-ის სეკრეციაα, ხოლო IL-6 განისაზღვრა ELISA ნაკრების გამოყენებით (R&D სისტემები) მწარმოებლის ინსტრუქციის შესაბამისად. SDE-ს გავლენა NO-სა და ციტოკინების წარმოებაზე განისაზღვრა 540 ნმ-ზე ან 450 ნმ-ზე Wallac EnVision-ის გამოყენებით.™მიკროფირფიტების წამკითხველი (PerkinElmer).

2.4. ოსტეოართრიტის საწინააღმდეგო აქტივობის შეფასებაინ ვივო

2.4.1. ცხოველები

მამრი სპრეგ-დოულის ვირთხები (7 კვირის) შეძენილი იქნა Samtako Inc.-ისგან (ოსანი, კორეა) და მოთავსებულნი იყვნენ კონტროლირებად პირობებში 12-საათიანი სინათლის/სიბნელის ციკლით.°C და% ტენიანობა. ვირთხებს ლაბორატორიული საკვები და წყალი მიეწოდათ.შეზღუდვაყველა ექსპერიმენტული პროცედურა ჩატარდა ჯანმრთელობის ეროვნული ინსტიტუტების (NIH) სახელმძღვანელო პრინციპების შესაბამისად და დამტკიცებული იყო დეჯონის უნივერსიტეტის (დეჯონი, კორეის რესპუბლიკა) ცხოველთა მოვლისა და გამოყენების კომიტეტის მიერ.

2.4.2. ვირთხებში OA-ს ინდუქცია MIA-თი

ცხოველები რანდომიზებულად შეირჩნენ და მკურნალობის ჯგუფებად დაიყო კვლევის დაწყებამდე (ჯგუფზე). MIA ხსნარი (3 მგ/50μ0.9%-იანი ფიზიოლოგიური ხსნარის 1 ლ (1 ლიტრი) პირდაპირ შეიყვანეს მარჯვენა მუხლის სახსარშიდა სივრცეში კეტამინისა და ქსილაზინის ნარევით გამოწვეული ანესთეზიის ქვეშ. ვირთხები შემთხვევითობის პრინციპით დაიყვნენ ოთხ ჯგუფად: (1) ფიზიოლოგიური ხსნარის ჯგუფი MIA ინექციის გარეშე, (2) MIA ჯგუფი MIA ინექციით, (3) SDE-თი დამუშავებული ჯგუფი (200 მგ/კგ) MIA ინექციით და (4) ინდომეტაცინის (IM-) დამუშავებული ჯგუფი (2 მგ/კგ) MIA ინექციით. ვირთხებს პერორალურად ეძლეოდათ SDE და IM MIA ინექციამდე 1 კვირით ადრე 4 კვირის განმავლობაში. ამ კვლევაში გამოყენებული SDE-ს და IM დოზირება ეფუძნებოდა წინა კვლევებში გამოყენებულ დოზებს [10,13,14].

2.4.3. უკანა თათის წონის განაწილების გაზომვები

OA ინდუქციის შემდეგ, უკანა თათების წონის ტარების უნარის თავდაპირველი ბალანსი დაირღვა. წონის ტარების ტოლერანტობის ცვლილებების შესაფასებლად გამოყენებული იქნა უუნარობის ტესტერი (Linton instrumentation, ნორფოლკი, დიდი ბრიტანეთი). ვირთხები ფრთხილად მოათავსეს საზომ კამერაში. უკანა კიდურის მიერ განხორციელებული წონის ტარების ძალა საშუალოდ გამოითვალა 3 წამიანი პერიოდის განმავლობაში. წონის განაწილების თანაფარდობა გამოითვალა შემდეგი განტოლებით: [წონა მარჯვენა უკანა კიდურზე/(წონა მარჯვენა უკანა კიდურზე + წონა მარცხენა უკანა კიდურზე)] × 100 [15].

2.4.4. შრატის ციტოკინების დონის გაზომვები

სისხლის ნიმუშები ცენტრიფუგირდა 1500 გ-ზე 10 წუთის განმავლობაში 4°C ტემპერატურაზე; შემდეგ შრატი შეგროვდა და გამოყენებამდე შეინახეს -70°C ტემპერატურაზე. IL-1-ის დონეებიβ, IL-6, TNF-αდა შრატში PGE2 გაიზომა R&D Systems-ის (მინეაპოლისი, მინესოტა, აშშ) ELISA კომპლექტების გამოყენებით, მწარმოებლის ინსტრუქციის შესაბამისად.

2.4.5. რეალურ დროში რაოდენობრივი RT-PCR ანალიზი

მუხლის სახსრის ქსოვილიდან მთლიანი რნმ ექსტრაგირებული იქნა TRI რეაგენტი®-ის (Sigma-Aldrich, სენტ-ლუისი, მისური, აშშ) გამოყენებით, უკუტრანსკრიფციული იქნა cDNA-დ და PCR-გამრავლებული იქნა TM One Step RT PCR ნაკრების გამოყენებით SYBR მწვანეთი (Applied Biosystems, გრანდ აილენდი, ნიუ-იორკი, აშშ). რეალურ დროში რაოდენობრივი PCR ჩატარდა Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR სისტემის (Applied Biosystems, გრანდ აილენდი, ნიუ-იორკი, აშშ) გამოყენებით. პრაიმერის თანმიმდევრობები და ზონდის თანმიმდევრობა ნაჩვენებია ცხრილში.1ნიმუშის cDNA-ების ალიკვოტები და GAPDH cDNA-ს თანაბარი რაოდენობა ამპლიფიცირებული იქნა TaqMan® Universal PCR მასტერ ნარევით, რომელიც შეიცავდა დნმ პოლიმერაზას, მწარმოებლის ინსტრუქციის შესაბამისად (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR პირობები იყო 2 წუთი 50°C-ზე, 10 წუთი 94°C-ზე, 15 წამი 95°C-ზე და 1 წუთი 60°C-ზე 40 ციკლის განმავლობაში. სამიზნე გენის კონცენტრაცია განისაზღვრა შედარებითი Ct (ზღურბლის ციკლის ნომერი ამპლიფიკაციის დიაგრამასა და ზღურბლს შორის გადაკვეთის წერტილში) მეთოდით, მწარმოებლის ინსტრუქციის შესაბამისად.

დეტალი