ოსტეოართრიტი (OA) არის ძვლის სახსრების ქრონიკული დეგენერაციული დაავადება, რომელიც გავლენას ახდენს 65 წელზე უფროსი ასაკის მოსახლეობაზე [
1]. ზოგადად, OA პაციენტებს უსვამენ დაზიანებული ხრტილის, ანთებითი სინოვიუმის და ეროზიული ქონდროციტების დიაგნოზს, რაც იწვევს ტკივილს და ფიზიკურ დისტრესს.
2]. ართრიტის ტკივილები ძირითადად გამოწვეულია სახსრების ხრტილის გადაგვარებით ანთებით, ხოლო როდესაც ხრტილი სერიოზულად დაზიანებულია ძვლები შეიძლება ერთმანეთს შეეჯახონ, რამაც გამოიწვია გაუსაძლისი ტკივილი და ფიზიკური გაჭირვება.
3]. ანთებითი შუამავლების ჩართვა ისეთი სიმპტომებით, როგორიცაა ტკივილი, შეშუპება და სახსრის სიმტკიცე კარგად არის დოკუმენტირებული. OA პაციენტებში ანთებითი ციტოკინები, რომლებიც იწვევენ ხრტილისა და სუბქონდრალური ძვლის ეროზიას, გვხვდება სინოვიალურ სითხეში.
4]. ორი ძირითადი ჩივილი, რომელიც ჩვეულებრივ აქვთ OA პაციენტებს, არის ტკივილი და სინოვიალური ანთება. ამიტომ, მიმდინარე OA თერაპიის ძირითადი მიზნებია ტკივილისა და ანთების შემცირება. [
5]. მიუხედავად იმისა, რომ ხელმისაწვდომი OA მკურნალობა, მათ შორის არასტეროიდული და სტეროიდული პრეპარატები, დადასტურებულია ეფექტურობით ტკივილისა და ანთების შესამსუბუქებლად, ამ წამლების ხანგრძლივ გამოყენებას აქვს ჯანმრთელობის მძიმე შედეგები, როგორიცაა გულ-სისხლძარღვთა, კუჭ-ნაწლავის და თირკმელების დისფუნქციები.
6]. ამრიგად, ოსტეოართრიტის სამკურნალოდ უნდა შემუშავდეს უფრო ეფექტური წამალი ნაკლები გვერდითი ეფექტებით.
ბუნებრივი ჯანმრთელობის პროდუქტები სულ უფრო პოპულარული ხდება, რადგან უსაფრთხო და ადვილად ხელმისაწვდომია [
7]. ტრადიციული კორეული მედიკამენტები ადასტურებენ ეფექტურობას რამდენიმე ანთებითი დაავადების წინააღმდეგ, მათ შორის ართრიტი [
8]. Aucklandia lappa DC. ცნობილია თავისი სამკურნალო თვისებებით, როგორიცაა qi-ს მიმოქცევის გაძლიერება ტკივილის შესამსუბუქებლად და კუჭის დასამშვიდებლად და ტრადიციულად გამოიყენება როგორც ბუნებრივი ტკივილგამაყუჩებელი [
9]. წინა ცნობები ვარაუდობენ, რომ A. lappa ფლობს ანთების საწინააღმდეგო [
10,
11], ტკივილგამაყუჩებელი [
12], კიბოს საწინააღმდეგო [
13] და გასტროპროტექტორული [
14] ეფექტები. A. lappa-ს სხვადასხვა ბიოლოგიური აქტივობა გამოწვეულია მისი ძირითადი აქტიური ნაერთებით: კოსტუნოლიდი, დეჰიდროკოსტუს ლაქტონი, დიჰიდროკოსტუნოლიდი, კოსტუსლაქტონი, α-კოსტოლი, საუსურა ლაქტონი და კოსტუსლაქტონი.
15]. ადრინდელი კვლევები ირწმუნებიან, რომ კოსტუნოლიდმა აჩვენა ანთების საწინააღმდეგო თვისებები ლიპოპოლისაქარიდში (LPS), რომელიც იწვევს მაკროფაგებს NF-kB-ს და თერმული შოკის პროტეინის გზის რეგულირების გზით.
16,
17]. თუმცა, არცერთ კვლევას არ აქვს გამოკვლეული A. lappa-ს პოტენციური აქტივობა OA მკურნალობისთვის. წინამდებარე კვლევამ გამოიკვლია A. lappa-ს თერაპიული ეფექტები OA-ზე (მონოსოდიუმ-იოდოაცეტატი) შსს და ძმარმჟავას ინდუცირებული მღრღნელების მოდელების გამოყენებით.
მონონატრიუმ-იოდოაცეტატი (MIA) ცნობილია ცხოველებში ტკივილის ქცევისა და OA-ს პათოფიზიოლოგიური მახასიათებლების წარმოქმნისთვის.
18,
19,
20]. მუხლის სახსრებში შეყვანისას, შსს არღვევს ქონდროციტების მეტაბოლიზმს და იწვევს ანთებას და ანთებით სიმპტომებს, როგორიცაა ხრტილოვანი და სუბქონდრალური ძვლის ეროზია, OA-ს კარდინალური სიმპტომები.
18]. ძმარმჟავას ინდუცირებული კრუნჩხვის რეაქცია ფართოდ განიხილება, როგორც პერიფერიული ტკივილის სიმულაცია ცხოველებში, სადაც ანთებითი ტკივილი შეიძლება რაოდენობრივად გაზომილი იყოს [
19]. თაგვის მაკროფაგების უჯრედული ხაზი, RAW264.7, ფართოდ გამოიყენება ანთებაზე უჯრედული რეაქციების შესასწავლად. LPS-ით გააქტიურებისას, RAW264 მაკროფაგები ააქტიურებენ ანთებით გზებს და გამოყოფენ რამდენიმე ანთებით შუამავალს, როგორიცაა TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS და IL-6 [
20]. ამ კვლევამ შეაფასა A. lappa-ს ანტინოციცეპციური და ანთების საწინააღმდეგო ეფექტები OA-ს მიმართ MIA ცხოველურ მოდელში, ძმარმჟავას ინდუცირებულ ცხოველურ მოდელში და LPS-გააქტიურებულ RAW264.7 უჯრედებში.
2. მასალები და მეთოდები
2.1. მცენარეული მასალა
A. lappa-ს გამხმარი ფესვი DC. ექსპერიმენტში გამოყენებული იქნა შეძენილი Epulip Pharmaceutical Co., Ltd.-დან (სეული, კორეა). ის იდენტიფიცირებული იყო პროფესორ დონგჰუნ ლიმ, მცენარეული ფარმაკოლოგიის დეპარტამენტი, კორეის მედიცინის პოლკოვნიკი, გაჩონის უნივერსიტეტი, და ვაუჩერის ნიმუშის ნომერი იყო დეპონირებული, როგორც 18060301.
2.2. A. lappa ექსტრაქტის HPLC ანალიზი
A. lappa ამოღებულია რეფლუქსის აპარატის გამოყენებით (გამოხდილი წყალი, 3 სთ 100 °C-ზე). მოპოვებული ხსნარი გაფილტრული და კონდენსირებული იყო დაბალი წნევის აორთქლების გამოყენებით. A. lappa-ს ექსტრაქტს ჰქონდა მოსავლიანობა 44,69% -80 °C-ზე გაყინვით გაშრობის შემდეგ. A. lappa-ს ქრომატოგრაფიული ანალიზი ჩატარდა HPLC-ით, რომელიც დაკავშირებულია 1260 InfinityⅡ HPLC-სისტემის გამოყენებით (Agilent, Pal Alto, CA, USA). ქრომატული გამოყოფისთვის EclipseXDB C18 სვეტი (4.6 × 250 მმ, 5 μm, Agilent) გამოყენებული იყო 35 °C ტემპერატურაზე. ნიმუშის სულ 100 მგ განზავებულია 10 მლ 50% მეთანოლში და სონიკირებულია 10 წუთის განმავლობაში. ნიმუშები გაფილტრული იყო შპრიცის ფილტრით (Waters Corp., Milford, MA, USA) 0.45 μm. მობილური ფაზის შემადგენლობა იყო 0.1% ფოსფორის მჟავა (A) და აცეტონიტრილი (B) და სვეტი გამოირეცხებოდა შემდეგნაირად: 0-60 წთ, 0%; 60–65 წთ, 100%; 65–67 წთ, 100%; 67–72 წთ, 0% გამხსნელი B დინების სიჩქარით 1.0 მლ/წთ. გამონადენი დაფიქსირდა 210 ნმ-ზე 10 μL ინექციის მოცულობის გამოყენებით. ანალიზი ჩატარდა სამჯერ.
2.3. ცხოველთა საბინაო და მენეჯმენტი
მამრი Sprague–Dawley (SD) 5 კვირის ასაკის ვირთხები და 6 კვირის ასაკის მამრი ICR თაგვები შეძენილი იქნა Samtako Bio Korea-დან (Gyeonggi-do, კორეა). ცხოველები ინახებოდა ოთახში მუდმივი ტემპერატურის (22 ± 2 °C) და ტენიანობის (55 ± 10%) და სინათლის/სიბნელის ციკლით 12/12 სთ. ცხოველები ექსპერიმენტის დაწყებამდე ერთ კვირაზე მეტი ხნის განმავლობაში ეცნობოდნენ მდგომარეობას. ცხოველებს ჰქონდათ საკვებისა და წყლის ad libitum მიწოდება. გაჩონის უნივერსიტეტში ცხოველთა მოვლისა და მოვლის ამჟამინდელი ეთიკური წესები (GIACUC-R2019003) მკაცრად იყო დაცული ყველა ცხოველის ექსპერიმენტულ პროცედურაში. კვლევა შემუშავებული იყო მკვლევარის მიერ ბრმა და პარალელური ცდა. ჩვენ მივყვეთ ევთანაზიის მეთოდს ცხოველთა ექსპერიმენტული ეთიკის კომიტეტის გაიდლაინების მიხედვით.
2.4. შსს ინექცია და მკურნალობა
ვირთხები შემთხვევით დაყვეს 4 ჯგუფად, კერძოდ შამ, საკონტროლო, ინდომეტაცინი და A. lappa. 2%-იანი იზოფლუორანის O2 ნარევით ანესთეზირებისას ვირთხებს გაუკეთეს 50 μL MIA (40 მგ/მ; სიგმა-ოლდრიჩი, სენტ ლუისი, MO, აშშ) ინტრა-სახსრში მუხლის სახსრებში, რათა გამოიწვიონ ექსპერიმენტული OA. მკურნალობა ჩატარდა შემდეგნაირად: საკონტროლო და შამ ჯგუფები შენარჩუნებული იყო მხოლოდ AIN-93G ძირითადი დიეტით. მხოლოდ, ინდომეტაცინის ჯგუფს მიეწოდება ინდომეტაცინი (3 მგ/კგ) ჩართული AIN-93G დიეტაში და A. lappa 300 მგ/კგ ჯგუფს მინიჭებული ჰქონდა AIN-93G დიეტა დამატებული A. lappa-ით (300 მგ/კგ). მკურნალობა გაგრძელდა 24 დღის განმავლობაში OA ინდუქციის დღიდან 15-17 გ სიჩქარით 190-210 გ სხეულის მასაზე ყოველდღიურად.
2.5. წონის ტარების გაზომვა
OA ინდუქციის შემდეგ, ვირთხების უკანა კიდურების წონის ტარების უნარის გაზომვა ჩატარდა შრომისუნარიანობის-MeterTester600-ით (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA), როგორც დაგეგმილი იყო. გამოითვლება წონის განაწილება უკანა კიდურებზე: წონის ტარების უნარი (%)
